为什么同一个对虾苗池中两次采样检测可能出现两种结果

如东县南美白对虾协会第249期消息2018年2月10日发布：

近期，协会针对养殖户及苗场对苗检的疑虑，专题请教水产专家。现转载水产专家对“为什么同一个池中两次采样检测可能出现两种结果”的解答。全文如下：
 
近期以来，在抽样检测过程中出现过同一池中两次采样检测出现两种结果。部分养殖户不能理解，甚至认为这一定是检测机构的问题。对此，给大家作如下解释。

同一池苗两次抽样出现不同的检测结果，一种原因就是抽样的代表性问题，第二可能是检测工作质量的问题。

一、关于抽样的代表性问题

检测的目的就是想知道是这个池里的虾苗带不带病原（以肝肠胞虫为例），也就是说这个池中的苗是阳性还是阴性。其实，对于同一苗池，虾苗带虫的情况有这样几种：一是池中每一只苗都是阴性，即0%阳性；二是每一只苗都是阳性，即100%阳性；三是同一池中有的苗为阳性，有的苗为阴性，阳性率在0-100%之间。多数是属于第三种情况，即并非全池苗都呈阴性或阳性，而是阳性和阴性苗共存于同池中。这主要是因为同一池苗并不是来源于一只亲虾，或不同虾苗个体存在免疫力差异的原因。对于第三种情况来说，我们很难测出具体该池中阳性苗的百分率。

实际检测中无法做到每一虾苗个体都检测。只能抽取一定数量的样品来代替整池苗的情况，所以检测的结果就有可能存在偏差。抽检只能从池中抽取极少一部分样品来代表。

关于抽样样品的代表性问题，同一个池中上百万的苗只抽了几百只，检测时也只检测其中的更少数个体，要想保证检测结果一致很难做到。试想一下，假设同一池中虾苗携带肝肠胞虫的实际比例（阳性率）是2%，一次从池中随机抽取200只苗，很难保证每一次都能抽样并检测到带虫的个体。因此，两次抽样检测出现不同结果就不难理解了。
 
为了使检测结果代表整池的可信度相对高，国家在动物疫病检测样品的抽取方面有技术标准可以参考，按照相关标准来抽样检测，依据统计学原理，可以获得较高可信度的检出结果来代表整体（全池），目前我们就是按照这样的标准来实施的，也是按照这样的方法来报告结果的，只不过用检测的结果来代表全池的情况的可信度达不到100%（只有每一只苗都检测的结果才达到100%）。
 
多数养殖户理解结果为阴性就代表该池中一定没有带虫苗，阳性就代表该池中所有苗都带虫。这是常规的思维方式，但是在水产苗种的抽样检测中需要调整思维。按照相关技术标准，只要出现过一次阳性，检测结果就应报阳性，但这并不代表池中每一只苗都是阳性，只是该池中有带虫苗。所以，如果你看到的结果是阳性，那一种可能是全池苗都是阳性，第二种是只有部分或者少部分苗是阳性，至少说该池中存在阳性的苗。如果检测结果是阴性，只是检测的样品虾苗不带虫，不代表该池其他虾苗一定没有带虫。但因为是随机抽样，一次抽样没有抽到阳性苗，说明该池中虾苗的阳性率不高或者就是全阴性。

二是检测工作质量和问题

影响检测结果的因素比较多，检测人员、检测方法、检测仪器、检测环境、检测试剂都会影响检测结果。只有检测方法一致了检测结果才可放在一起比较，所以检测一定要采用标准方法实施，检测工作要经过认证。仪器对检测结果影响较大，包括PCR仪在内的检测仪器须经法定计量部门的检定和校准，才能确保检测结果的准确。就像买了称回来需经校准才能用作公平称，否则公平就无从谈起。另外检测环境也可能影响检测的结果，需要确保检测空间有无目的基因气溶胶存在，这样才能避免假阳性的出现。另外，检测样品的数量也是影响结果的重要影响因素，可能一次一个样品和一次一百个样品的检测结果可能有不同。
 
因此，同一批次虾苗的不同样本，出现两个不同检测结果是可能的。如果是因为检测工作质量的问题，那检测结果就不可信。如果是样品本身代表性的问题，那应该去科学认识。广大养殖户在采购苗种的时候一定注意查看检测报告，真正理解检测的结果，科学利用检测结果。
 
检测的意义是让养殖户了解这里面是不是有阳性苗，如果报告为阳性，表明该池中检测到了肝肠胞虫，无论是全池苗带虫还是部分苗带虫，都是养殖户不欢迎的虾苗。检测结果为阴性，在规范抽样和检测的样品数量下，其中阳性虾苗数量相对较低或者没有，风险也比没有检测过的苗要小很多。因此，养殖户参考检测结果去采购虾苗可以较大程度上降低养殖风险。


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